"Pejman"
دستیار مدیر مهندسی کشاورزی گیاهان دارویی
روش RT-PCR-RE يك راه ساده براي تشخيص و تفريق نمونه هاي مشكوك مي باشد. با استفاده از اين روش تفريق ويروسهاي بسيار حاد بورس عفوني كشور هند از ويروسهاي كلاسيك (فيلد/واكسن) صورت گرفت. قطعه 552 نوكلئوتيدي ناحيه متغير ژن VP2 در سه ويروس كلاسيك فيلد، دو سوش واكسن و دو ويروس بسيار حاد بيماري بورس عفوني تكثير شده، سپس توسط آنزيمهاي محدود كنندهSacI ، HhaI، SspI، StuI مورد هضم آنزيمي قرار گرفتند. هضم آنزيمي محصولات PCR اين ويروسها با آنزيمهاي محدود كننده SacIو HhaI مويد وجود يك محل آنزيمي براي هر دو آنزيم در تمامي ويروسهاي كلاسيك فيلد و سوشهاي واكسن و عدم وجود محل آنزيمي در ويروسهاي بسيار حاد بيماري بورس عفوني بود. در صورتيكه هضم آنزيمي محصولات PCR با آنزيمها SspI و StuI نشان داد كه ويروسهاي كلاسيك فيلد و سوشهاي واكسن، محلي براي برش اين آنزيمها ندارند ولي محصولات PCR ويروسهاي بسيار حاد داراي يك محل برش آنزيمي، براي هردو آنزيم بودند. اگرچه پروفايل هضم آنزيمي آنزيمهاي استفاده شده در ويروسهاي كلاسيك فيلد و سوشهاي واكسن مشابه بود ولي اين آنزيمها هريك به تنهائي توانائي تفريق ويروسهاي بسيار حاد از ويروسهاي كلاسيك فيلد و سوشهاي واكسن بيماري بورس عفوني را داشتند